猪病 毒被证明可以搭饲料的便车,为了解决这个问题,养猪行业应用了一系列的减毒措施,其中一条是在特定环境下延长饲料存放时间。
“这种方法的原理是基于对于病毒半衰期的数学估计”,Pipestone 应用研究部主任 DVM Scott Dee说,:“但是并没有灭活病毒所需时间和温度的实际数据。”
他与两所大学和一个营养研究所合作,开展了一个实验室分析,评估将饲料中病毒减毒至零风险所需的储存条件,然后在真实的存放环境下进行了进行了进一步的验证。
实验室评估结果
他们的团队首先验证一个假设,即通过控制饲料存储温度可以实现减少病毒风险。他们使用了三种病毒:塞内卡谷A(用于代表口蹄疫)、蓝耳病毒PPRSV和流行性腹泻病毒PEDV。
取传统豆粕、有机豆粕、赖氨酸、胆碱和维生素A每种样品30g两组,向每个样品中加入2ml的三种病毒的混合液,病毒浓度2 x 105TCID50。然后一组样品存放在室内20℃条件下,模拟仓库温度;另一组放在户外(2020年2月份,平均温度-8.8℃)。存放时间为30天。
研究者使用PCR和病毒活性测定来评估样品中病毒的活力。“所有在户外存放的5个样品都是PCR阳性且病毒具有感染性。”Dee表示:“所有室内的5个样品都,三种病毒PCR均为阳性,但是都没有检出活病毒。”
生产环境实测
Dee的团队进一步把这个验证扩展到实际生产条件中。他们使用了使用了三种原料,有机豆粕、传统豆粕和赖氨酸,每种原料设置两个样本,吨包形式。
对饲料进行污染时使用“热点”模型,三种5log浓度的病毒在-80℃下冷冻在大冰块中,然后丢在每一个吨包中,让其自然融化。
每个吨包外面放置一个温度记录器,记录35天的存放时间中的温度变化。室内存放使用温控器控制环境温度在19-20℃。室外存放为典型的猪场棚子,环境温度完全取决于天气变化,记录到的温度值为-5.6℃ 到 +1.7摄氏度。
对于所有吨包样本,在接种后的第0天和第36天进行PCR和病毒活性测试。每个吨包采用10点采样,采样后混合检测。
实验结果,对于室内存放的样本,Dee团队在第0天采样时并没有遇到好运气,并没能找到病毒热点。“这说明很难找到”他指出:“在第36天我们找到了个别样品的三种病毒RNA阳性,但是确实还是很容易错过。”
在寻找户外吨包的热点中,他们的运气稍好一些,找到了病毒RNA。“我想可能是我们运气比较好,但这确实说明了这种方法的一些优点和缺点。”Dee说。
在生物分析上,对于室内存放的样本,他们将三个样本(传统豆粕、有机豆粕和赖氨酸)混合,接种的方式包括:口——PEDV,鼻——SVA、肌注——PRRSV。“这是很强力的攻毒,”Dee说:“通过口腔液和剖检我们没有发现任何感染迹象。”
对于户外存放的吨包样品,他们采用了相同的处理方式,但是结果完全不同。Dee说:“这些病毒在户外寒冷环境中存活的非常好。”
温度和时间,哪个更重要?
zui终的实验结果显示,在19-20℃环境下存放35天可以有效的失活病毒。但是根据户外样本的实验结果,在杀灭病毒方面,温度比时间要更为关键。所以在温度达不到的情况下,仅靠延长饲料存放时间是很难完全灭活病毒的。