近几年由于非瘟的出现,很多规模场相应的建立了自己的实验室,对我们防控非瘟起到了重要的作用。与此同时一个问题出现,我们实验室的污染问题如何防范,消毒工作怎么做,如何保证我们不会出现假阳性的数据呢?
一、分区操作
进行实验操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,所以有条件的一定要进行分区操作,zui大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。
1、试剂准备区
2、样品制备区
3、PCR扩增区及分析区
各工作区要有一定的隔离,操作器材专用,要有一定的方向性。如:试剂准备→样品制备区→PCR扩增区及分析区。
二、分区清洁
做好了标准的分区操作同时要注意消毒工作。
有人情况下,不要使用化学消毒剂进行喷雾和紫外线灯空气消毒。
清洁区:办公等有窗户的区域若无明显污染,每天定期开窗通风换气数次,湿式清洁桌面、台面和所有物体表面和地面至少1次。相对封闭等无窗户的清洁区若无明显污染,每天湿式清洁桌面和地面至少1次。
半污染区:定期进行半污染区环境清洁消毒,每天工作结束后,物体表面、地面和空气各消毒1次。
污染区:遇到污染情况随时消毒,每天工作开始前及结束后, 生物安全 柜、实验室台面、地面和空气各消毒1次,废弃标本和实验污物应分类进行消毒灭菌处理
三、消毒工作
工作服若有明显的污染,随时更换,及时进行消毒灭菌。拖鞋每天用1000mg/L含氯消毒剂浸泡或擦拭1次;所有清洁消毒器材(抹布、拖布、容器)各室专用,用后1000mg/L含氯消毒剂消毒,洗净晾干
一般物体表面:1000mg/L含氯消毒剂或2000mg/L过氧乙酸溶液或200mg/L二氧化氯均匀喷洒或擦拭,作用10-15min。光滑的物体表面还可以采用紫外线灯消毒。
污染的物体表面或地面:有明显污染、如样品外溢、洒落于台面或物体表面等,立即用纸巾覆盖,从外向内倾倒稀释一定比例的含氯消毒剂(卫可),作用30min,再清理,置于医疗废物袋。
生物安全柜消毒:实验结束时,包括仪器设备在内的生物安全柜里的所有物品都进行表面清洁,并移出安全柜;在每次使用前后,要清除生物安全柜内表面的污染,工作台面和内壁用1000mg/L消毒剂擦拭,10-15min后,用无菌水再次擦拭;或者直接用84消毒液、75%酒精擦拭消毒。