一、血清样本采集方法
1. 一般情况下,采集总样本数应该为群体总量的 5‐ 10%;
2. 样本来源:一般应该来自于已出现症状的群体或者根据具体检测的项目来确定,根据猪场规模大小确定每组的样本数,少于 300头母猪的场每组 5份, 300-700头母猪的场每组 7份, 701-1000头母猪的场 8份, 1001-2000头母猪的场 10份,大于 2000头的场每组 11-15份。
3. 所有样本必须是随机采样的(不要在同一个圈栏采多个样);
4. 使用前腔静脉丛采血,因为这种方式血样被污染的可能性较小;
5. 详细记录样本来源信息:耳牌或耳刺(日龄),栋舍及栏位,采集的日期。
二、采集器材
1. 要做到一个样本使用一套独立的采血器材;
2. 尽可能使用采血专用器材(一次性双向采血针,无抗真空采血管);
3. 请妥善处理采血后的器材,高温蒸煮或者焚毁;
工作人员现场前腔静脉采血
工作人员现场前腔静脉采血
三、血样的分离、保存及送检
1. 血样采集后,有条件的场可以将全血立即使用离心机分离,也可以放置在 0℃以上 20℃以下的环境中 (如冰箱冷藏室 )静置进行自然分离;
2.等血样出现明显的上、下两层(上为淡黄色血清,下为深红色固形物)时, 小心地将上层血清分为两等份,分装入干燥干净的无菌小试管或者专用小离心试管中;
3. 使用不干胶或者手术胶带,对分装的血清进行标记,每一份血样的第一次分装出来血清作为检测样本,第二份分装出来的血清作为备份冷冻保存,两份血清使用同样的记录标识;
4. 建议标示方法:一般保育猪血清以 N 开头,肥育以 F 开头,经产母猪以 S 开头(不同的胎次以 ABC 做序列),成年公猪以 B 开头,产房的仔猪以 P 开头,后备猪以 G开头进行编号。
5.环境温度低于 4℃时,途中运输的时间小于 24 小时, 则不必对血清冷冻保存, 但若运输时间超过 24 小时,则血清运输前应该冷冻;若环境温度高于 15℃,血清运输之前必须进行冷冻,并使用冰块和保温箱进行保存;
6. 若运输的任何环节的包装内环境温度大于 25℃且时间持续 4 小时以上, 则血清必须冷冻并通过航空快递的方式运输;
7. 冻结的全血或长途颠簸的非冻结全血的检测意义大打折扣,甚至毫无检测意义
8. 血样分离时对血清的要求
a) 每一份血清的量不得少于 1 毫升;
b) 请尽可能随机采样,各类别采集数量据检测计划;
c) 血清寄出之前请冷冻保存;
d) 每个猪场请填写一份“血清记录表”上的相关内容(含场内免疫程序及疫苗厂家),并随血清寄出;
e) 农场请冷冻保存一份备份血清,保存 2 年
9. 寄送地址要详细,使用 EMS等物流寄送要及时联系、以便全程跟踪。
四、常规抗体检测结果分析